LE COUPLAGE CHROMATOGRAPHIE / SPECTOMETRIE DE MASSE (GC/MS) :
Instrumentation, interprétation des spectres et applications

Durée : 3 jours

Prix : 1490 € H.T.

PUBLIC - NIVEAU

Cadres et techniciens désirant approfondir leurs connaissances dans le domaine des couplages GCMS.

 

OBJECTIF

 

Les couplages GCMS se sont largement répandus, ces dernières années, dans la plupart des laboratoires analytique.
L'objectif de ce stage est donc d'acquérir les notions théoriques et pratiques nécessaires à une utilisation optimale des couplages MS et Chromatographies en Phase Gazeuse.

PROGRAMME

 
. Généralités

I. INTRODUCTION

I.1 Spectres de masse
I.2 Historique
I.3 Généralités et concepts
I.4 Le spectromètre de masse

II. CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE

II.1 Généralités
II.2 Rappel des notions de base en GC
II.3 Instrumentation
- Injecteurs
- Phases stationnaires des colonnes capillaires
- Critères de choix des colonnes en fonction des applications
- Quelques mots sur la dérivatisation des échantillons

III. INSTRUMENTATION EN SPECTROMETRIE DE MASSE

III.1 Techniques d’ionisation
- Ionisation électronique (EI)
- Ionisation chimique (CI)
- Le couplage avec la GC

III.2 Les analyseurs
- L’analyseur quadripolaire
- L’analyseur a piégeage (Ion Trap)
- L’analyseur à temps de vol (TOF)

III.3 La spectrométrie de masse multidimensionnelle (MS/MS)
- Le couplage des analyseurs
- La MSn
- Modes de détection (scan, SIM, SRM, MSn…)

IV. INTERPRETATION

IV.1 Les outils de l’interprétation spectrale
- Généralités ; définitions ; conventions
- Isotopie
- La masse des ions
- Le spectre de masse : caractéristiques

IV.2 Formation des ions : L’ion moléculaire
- Aspect énergétique de l’ionisation électronique
- L’ion moléculaire
- Le devenir de l’ion moléculaire

IV.3 Les ions
- Les ions à nombre impair d’électrons
- Les ions à nombre pair d’électrons
- Stabilité relative des ions et des radicaux
- Relation parité/masse
- La règle de l’azote

IV.4 Mécanismes de fragmentation
- Dissociation unimoléculaire de l’ion moléculaire : Conséquences
- Initiation de la réaction de dissociation
- Fragmentation initiée par le radical
- Fragmentation initiée par la charge
- Pertes logiques de neutres
- Fragmentations de cycles

V. INTERPRETATION : LA MARCHE A SUIVRE VI. OPTIMISATION D’UNE METHODE DE GC/MS

VI.1 Applications et cas réels commentés
- Préparation de l’échantillon
- Optimisation chromatographique
- Critères de choix du mode d'ionisation (EI vs CI),
- Choix du mode d'acquisition TIC, SIM, MRM, SIS ou MS n
- …

FORMATEUR

 Dr Lionel Massi, Responsable de Laboratoire, Spectrométrie de masse, Université de Nice Sophia-Antipolis

 

Pour en savoir plus :
www.idecos.org

1. Présentation des différentes approches permettant de faire des séparations rapides

- Supports monolithiques : avantages, inconvénients, exemples.
- Chromatographie liquide à haute température (T>60°C) : règles à appliquer, instrumentation, principales limitations.
- Utilisation de phases stationnaires sub-2µm : intérêt de ce type de colonnes.


2. Compatibilité de l’instrumentation avec la chromatographie rapide : effets extra-colonne

- Présentation des effets extra colonne : utilité et moyen de les déterminer.
- Paramètres instrumentaux à adapter pour l’UPLC en modes gradient et isocratique (constante de temps, volume d’injection…).
- Comparaison des instrumentations HPLC et UPLC.


3. Apport des particules sub-2 µm : potentiel de l’UPLC vs. HPLC

- Paramètres fondamentaux de la chromatographie.
- Influence des paramètres chromatographiques sur la qualité de la séparation (phase stationnaire, phase mobile, nature du soluté).
- Utilisation d’une feuille de calcul.


4. Développement de méthode en modes isocratique et gradient

- Paramètres importants à considérer, problèmes des composés ionisables.
- Approche de type essai-erreur pour l’UPLC (sélection des conditions opératoires génériques).
- Utilisation d’un logiciel d’optimisation (ex. Chromsword, Drylab ou Osiris).
- Exemples d’application.


5. Transfert de méthodes en modes isocratique et gradient

- Règles de transfert en mode isocratique.
- Règles de transfert en mode gradient.
- Exemples d’application et utilisation d’une feuille de calcul.


6. Futures tendances de la chromatographie rapide

- Couplage haute température et UPLC.
- Utilisation de pressions supérieures à 1000 bars.