PROGRAMME 

Premier jour : 

 1. La validation des méthodes d’analyse

  - Introduction : Les textes réglementaires et recommandations ICH.

 - Les critères de validation, définitions et implications pratiques pour la validation :

•      Spécificité
  
•     Fidélité (répétabilité, fidélité intermédiaire, reproductibilité)
•     Linéarité, fonction de réponse
•     Seuil de détection, seuil de quantification
•     Exactitude, justesse
•     Intervalle de mesure
•     Robustesse, test de conformité
  

 
2. Tests proposés pour la validation des méthodes : description, utilisation, limites

  -  Notions d’erreur aléatoire et d’erreur systématique

 - Notions de variance et d’écart type

 - Tests de recherche d’aberrance : Dixon, Grubbs, Cochran, Bartlett

 - Test de comparaison de variances : Fisher-Snedecor

 - Utilisation du t de Student

 - Test de comparaison de valeurs : Student

 - Normalité de la distribution : Shapiro-Wilk

3. Les plans de travail : différents référentiels, différentes propositions ?

   -  Plan de travail selon ICH / SFSTP 1992 et 2003-2006

 - Evolution du plan pour l’étude de l’exactitude et de la fonction de réponse

 - Plan de travail selon NF V03-110

 - Similitudes avec le plan ICH / SFSTP

 - Plan de travail selon NF T90-210

 - Particularités du plan, ses spécificités et sa transposition dans d’autres domaines d’activité

4. Application à la validation des méthodes, méthodes de calcul des différents critères de validation

 - Etude de la spécificité

•     Cas général
•     L’étude des interférences selon NF T90-210

Deuxième jour : 

 5. Application à la validation des méthodes, méthodes de calcul des différents critères de validation (suite)

 - Calculs de fidélité

•      Avoir une bonne notion de la fidélité intermédiaire

 - Etude de la fonction de réponse

•   Les propositions normalisées
•   Les outils de linéarisation
•   Les modèles non linéaires

 - Calculs de linéarité

•   L’analyse de variance « classique » selon ISO 11095 (SFSTP 1992
•   La proposition ISO 8466 pour les grands intervalles de mesure
•   Le travail sur les concentrations prédites inverses, proposition NF T90-210

 - Méthodes d’estimation des limites de détection et de quantification

•   Les propositions ICH
•   L’utilisation de la norme ISO 11843 « Capacité de détection »
  

 - Calculs d’exactitude, notion de profil d’exactitude et d’intervalles de tolérance

•    La justesse de la méthode : linéarité de la relation entre concentration vraie et concentration calculée
•    Protocole selon ISO 5725 : circuits inter-laboratoires
•    Protocole ISO 16269-6 : intervalles de tolérance
•    Protocole SFSTP 2003-2006, NF V03-110, intervalles prévisionnels de tolérance béta
•    Protocole NF T90-210
  

Les particularités de la norme NF T90-210

•    L’étude d’une limite de quantification présupposée
•    L’étude des rendements d’extraction (préparation des échantillons)

Lors du cours, des dossiers de validation réalisés à l’aide d’un logiciel de validation analytique seront utilisés pour illustrer par des exemples concrets les différentes étapes de calcul et l’interprétation des résultats.

Une attention toute particulière sera portée sur l’intérêt de chaque proposition et sur les synergies entre celles-ci.

Troisième jour : 

 6. Exercices pratiques de calculs statistiques de validation de méthodes d’analyse

 - Exemple 1 : Validation du dosage d’un composé dans une formule industrielle (ICH, SFSTP)

•    Validation de la linéarité
•    Etude de l’exactitude à l’aide des intervalles de tolérance

 - Exemple 2 : Validation du dosage d’une substance naturelle (ICH SFSTP, NF V03-110)

•    Etude de la fidélité intermédiaire
•    Estimation des limites de détection et de quantification
•    Validation de la linéarité

  - Exemple 3 : conséquences du choix de la fonction de réponse sur un dosage de traces (SFSTP, NF V03-110)

•    Etude de l’exactitude selon deux modèles : linéaire et quadratique
•    Interprétation des intervalles de tolérance, choix du modèle

 - Exemple 4 : Application du protocole NF T90-210

•    Intérêt du protocole dans l’analyse de la fonction de réponse
•    Particularité de l’étude de l’exactitude

Les calculs sont réalisés par les stagiaires à l’aide d’exemples (dossiers de validation de procédures analytiques en chromatographie liquide et spectrophotométrie UV-visible), les tables statistiques nécessaires sont fournies, il est demandé aux stagiaires d’avoir à leur disposition une calculatrice scientifique pour réaliser les calculs.