LES NOUVELLES TENDANCES HPLC : COMMENT AMELIORER SA PRODUCTIVITE AU LABORATOIRE ?

LES NOUVELLES TENDANCES HPLC : COMMENT AMELIORER SA PRODUCTIVITE AU LABORATOIRE ?
	Durée : 2 jours Prix : 1050 € H.T.

PUBLIC - NIVEAU

Toute personne ayant préalablement une expérience dans le domaine de la chromatographie en phase liquide désirant se tenir à jour des nouveautés récemment mises sur le marché dans le domaine de l’HPLC.

OBJECTIF

Le but de ce stage est de discuter des nouveautés de ces dernières années dans le domaine de la chromatographie en phase liquide, tels que les technologies UHPLC, fused-core ou monolithes pour réaliser des séparations rapides ou à haute résolution ; les solutions pour rendre l’HPLC plus « verte », la chromatographie HILIC pour l’analyse de composés polaires ; l’utilisation de température ou de pH de phase mobile plus élevés que la normale ; les logiciels d’optimisation pour le développement automatisé de méthodes...

PROGRAMME

1. Présentation des différentes approches permettant de faire des séparations rapides ou à très haute résolution

- Rappels théoriques

- Utilisation de supports monolithiques

- Utilisation de particules superficiellement poreuses (fused-core, core-shell…)

- Utilisation de phases stationnaires sub-2µm et ultra hautes pressions (UPLC, RRLC, UHPLC…)

2. Les nouveaux systèmes chromatographiques disponibles sur le marché

- Revue de détail des systèmes LC et critères de choix

- adéquation entre géométrie de colonne et instrumentation (effets extra-colonne)

3. Les solutions pour faire de la chimie verte en chromatographie liquide

- Chromatographie liquide à haute température (T>60°C) : règles à appliquer, instrumentation, principales limitations.

- Utilisation de CO₂en phase supercritique

- Optimisation de la géométrie des colonnes HPLC et règles de transfert de méthode

4. La chromatographie HILIC

- Présentation de la technologie HILIC, type de supports et de phases mobiles à utiliser

- Application du mode HILIC pour la séparation de composés polaires

- Autres avantages du mode HILIC (orthogonalité par rapport à la RPLC, amélioration de la sensibilité en MS…)

5. La chromatographie liquide dans des conditions de pH basique

- Le rôle primordial du pH en HPLC, préparation des tampons

- Choix du pH en fonction de la nature des analytes

- Colonnes stables à hauts pH : applications possibles

- Couplage LC-MS : comparaison à pH acide et basique

6. Les nouvelles tendances pour le développement de méthode HPLC

- Le mode gradient: principe de fonctionnement et utilité

- Paramètres les plus influents pour la mise au point d’une méthode (pH, phase stationnaire, phase mobile, température…)

- Principe et Utilisation d'un logiciel d'optimisation (ex. Chromsword, Drylab ou Osiris), exemples d'application.

FORMATEUR

Dr Davy GUILLARME, Laboratoire de Chimie Analytique Pharmaceutique (LCAP), Université de Genève

Pour en savoir plus :
www.idecos.org

1. Présentation des différentes approches permettant de faire des séparations rapides

- Supports monolithiques : avantages, inconvénients, exemples.
- Chromatographie liquide à haute température (T>60°C) : règles à appliquer, instrumentation, principales limitations.
- Utilisation de phases stationnaires sub-2µm : intérêt de ce type de colonnes.

2. Compatibilité de l’instrumentation avec la chromatographie rapide : effets extra-colonne

3. Apport des particules sub-2 µm : potentiel de l’UPLC vs. HPLC

- Paramètres fondamentaux de la chromatographie.
- Influence des paramètres chromatographiques sur la qualité de la séparation (phase stationnaire, phase mobile, nature du soluté).
- Utilisation d’une feuille de calcul.

4. Développement de méthode en modes isocratique et gradient

- Paramètres importants à considérer, problèmes des composés ionisables.
- Approche de type essai-erreur pour l’UPLC (sélection des conditions opératoires génériques).
- Utilisation d’un logiciel d’optimisation (ex. Chromsword, Drylab ou Osiris).
- Exemples d’application.

5. Transfert de méthodes en modes isocratique et gradient

- Règles de transfert en mode isocratique.
- Règles de transfert en mode gradient.
- Exemples d’application et utilisation d’une feuille de calcul.

6. Futures tendances de la chromatographie rapide

- Couplage haute température et UPLC.
- Utilisation de pressions supérieures à 1000 bars.